Как и чем стимулировать фибробласты: некоторые правила омоложения

Фибробласты — что это такое

В Европе фибробласты широко применяются в терапии различных заболеваний и омолаживающих косметических процедурах с конца 90-х годов.

С 2000 годов технология получила развитие и процедуры по лечению и омоложению проводятся в ведущих клиниках США, Британии и Швейцарии собственными клетками соединительной ткани или выражаясь научно – фибробластами.

Процедуру дешевой не назовешь – стоит она от семи тысяч долларов, но как говорят счастливчики, испытавшие ее чудодейственный эффект — затраты оправдывают себя тысячекратно.

Давайте подробно разберемся с тем, что это за технология и что такое фибробласты.

Фибробластами в профессиональной медицине называют клетки рыхлых соединительных тканей. Эти клеточки имеют особенную, удлиненную форму и внешне похожи на небольшое веретенце, от которого в разные стороны идет множество отростков. Фибробластовые клети располагаются в средних слоях кожи, и именно из этих кожных клеток формируется каркас эпителия.

Кратко можно сказать, что в функции фибробластов входит также выработка важных биологически активных веществ и обеспечение полноценного процесса клеточного метаболизма. Но на деле у фибробластов гораздо больше функций, поговорим о полезных качествах кожных клеток в следующем разделе статьи.

Отличие от других методик

Главное отличие от других методик — это используемый препарат. Восстановление кожи пациента происходит за счёт собственных клеток, которые культивируются в лабораторных условиях.

В ходе процедуры на кожу пересаживаются живые клетки, которые резко ускоряют механизм регенерации кожи благодаря продукции ими ростовых факторов и компонентов каркаса дермы. Метод не только корректирует видимые дефекты кожи, но и восстанавливает ее на уровне микротекстуры.

Современные косметологические методики (антиоксиданты, гидранты, эластостимуляторы, биостимуляторы, капилляропротекторы и др.) оказывают определенный омолаживающий эффект, однако принцип действия построен на коррекции последствий старения. Заместительная клеточная терапия решает проблему увядания кожи на принципиально другом уровне: процесс снижения запасов собственных клеток кожи останавливается. Это означает, что процесс старения в обрабатываемой зоне не просто останавливается, а даже поворачивается вспять.

Регенеративная терапия лечит возрастные изменения кожи, когда остальные методы лишь корректируют их последствия.

Функции клеток

Фибробласты синтезируют и выделяют в пространство между клетками особенные вещества, которые помогают дерме сохранять эластичность и упругость. Благодаря этому идет активная стимуляция выработки коллагеновых и эластиновых волокон, а также межклеточного вещества, которое похоже на густой гель. Этот гель заполняет пространство между клетками и его компонентами являются сохраняющая влагу гиалуроновая кислота и важные элементы вроде нидогена, тинасцина и протегликана;
Фибробласты – также вырабатывают вещества-ферменты, способные очищать межклеточное пространство от старых волокон. Таким образом, в слоях дермы идет постоянное обновление, и кожа сохраняет свежесть и молодость.

Клетки этого типа также отвечают за синтез особого вида белков, которые способствуют регенеративным процессам в эпителии.

ФИБРОБЛАСТЫ

Фибробласты формируют внеклеточный матрикс. Они делают ткань более плотной и принимают участие в заживлении ран. Фибробластоподобные клетки активно перемещаются в развивающемся эмбрионе и дают начало ряду мезенхимальных тканей. Таким образом, кроме обеспечения постоянства клеточной формы или ее однократного стереотипного изменения, кроме участия в распластывании клетки на субстрате, цитоскелет фибробластов должен выполнять еще и функции, связанные с активным движением, поляризацией клетки и генерированием натяжения. Отметим также, что поскольку фибробласты — эукариотические клетки, они способны к направленному перемещению веществ внутри клетки. Такое расширение списка функций отражается в усложнении организации цитоскелета.

Структура цитоскелета фибробласта существенным образом зависит от того, в какой фазе цикла и на каком субстрате он находится. Так, перестройка цитоскелета, наблюдающаяся при пересеве культивируемых клеток, сравнима с той, которая происходит по окончании митоза, в эмбриогенезе или при заживлении ран. Однако культивируемые клетки — значительно более удобный объект для наблюдения и экспериментов. Округленный фибробласт отвечает на контакт с приемлемым субстратом формированием многочисленных филоподий. Эти тонкие, длинные отростки как будто ощупывают пространство вокруг фибробласта. Там, где они коснутся субстрата, может начаться процесс прикрепления к нему. Если образуется контакт с незакрепленной частицей, филоподия нередко прилепляется к ней и втягивается вместе с ней обратно. Как только число контактов клетки с субстратом становится достаточно велико, ее край как бы покрывается рябью; этот процесс и процесс образования филоподий могут сменять друг друга. Актин на этой стадии обнаруживается в больших количествах в складках клеточного края и в толстых волокнах, пересекающих околоядерное пространство. По мере того как клетка продолжает распластываться, эти волокна перераспределяются и образуют во внутренних областях клетки сеть с ячейками в форме многоугольников. В течение последующих часов полигональная актиновая сеть перестраивается в так называемые волокна натяжения, и клетка приобретает характерный для интерфазного фибробласта вид. Перераспределение тропомиозина происходит несколько иначе. На ранних стадиях, когда большое количество актина содержится в складках клеточного края и трансъядерных волокнах, практически весь тропомиозин диффузно распределен вокруг ядра. По окончании формирования полигональной сети тропомиозин обнаруживается уже в ней, отсутствуя, правда, в вершинах многоугольников. После перестройки сети тропомиозин располагается вдоль волокон натяжения с периодом приблизительно 1,5 мкм. Еще один тип перераспределения демонстрирует а-актинин. На самых ранних стадиях этот белок, как и тропомиозин, распределен диффузно в центре фибробласта. Однако примерно через восемь часов он образует небольшие скопления, совпадающие с вершинами актиновых многоугольников. В местах расположения этих скоплений находятся так называемые фокальные контакты, т. е. те участки, где клетка приближается к субстрату на расстояние менее 15 нм. После завершения перестройки фибробласта а-актинин оказывается связанным с волокнами натяжения, располагаясь вдоль них с тем же периодом, что и тропомиозин (т. е. около 1,5 мкм), но в противофазе с ним, и, кроме того, концентрируется в складках мембраны на краю клетки. В фибробластах встречаются и некоторые другие белки, ассоциированные с актином. Миозин находят преимущественно в волокнах натяжения, более или менее в тех же местах, что и тропомиозин; он отсутствует в микроотростках клетки, складках клеточного края и фокальных контактах. Один из немногих белков, распределенных подобно актину — филамин. Единственное место, где есть актин, но нет филамина — это самые кончики микроотростков. В свою очередь, филамин имеется в пространстве между волокнами натяжения, весьма вероятно поэтому, что он может быть ассоциирован в клетке не только с актином, но также и с другими белками. Два актин-связывающих белка — фимбрин и винкулин — распределены в полностью распластанном фибробласте наиболее удивительно. Фимбрин (мол. масса 68 кДа) был первоначально выделен из микроворсинок. Небольшое количество этого белка есть в волокнах натяжения,, но в основном он обнаруживается на периферии клетки: его много в складках клеточного края, микроотростках, микроворсинках и филоподиях. В отличие от фимбрина, винкулин ассоциирован преимущественно с фокальными контактами; помимо того, немного винкулина диффузно распределено в центральной части клетки. Винкулин остается связанным с обращенной к цитоплазме поверхностью клеточной мембраны в точках фокальных контактов даже после того, как актин был тем или иным способом из фокальных контактов удален. По этой причине винкулин считают одним из белков, расположенных в фокальных контактах наиболее близко к плазматической мембране. Актин в фибробластах служит компонентом цитоскелетных структур, и каждая из них характеризуется своим спектром ассоциированных с актином белков. При. всяком серьезном исследовании цитоскелета фибробластов возникает один и тот же настоятельный вопрос: почему разные ассоциированные с актином белки локализуются в разных частях клетки? Для некоторых из этих белков ограничения в распределении, вероятно, могут быть обусловлены наличием у них дополнительной связывающей активности: для винкулина, например, это способность связываться с мембраной. Будет ли такое объяснение адекватным и во всех других случаях или придется дополнительно учитывать иные динамические взаимодействия, станет ясно лишь в ходе дальнейших исследований. Вторая из основных фибриллярных систем фибробласта — это система микротрубочек. Микротрубочки сходятся, как в фокусе, в районе центриолей, в центральной части клетки. Сразу после пересева клеток никакой сложной сети микротрубочек в них не видно. Однако со временем микротрубочки удлиняются, становятся изогнутыми и в конце концов достигают периферии клетки. Микротрубочки имеются также в клетке во время митоза; кроме того, их находят в первичной ресничке, рудиментарной жгутикоподобной органелле. В интерфазе микротрубочки принимают участие в процессе поляризации клетки, от них зависит способность клетки формировать складки и филоподии лишь с одного края и осуществлять направленное движение. Микротрубочки нужны также для транспортировки материала, для внеклеточного матрикса от аппарата Гольджи наружу. Третью основную фибриллярную систему в фибробластах образуют промежуточные филаменты виментинового типа. Они заполняют, переплетаясь, центральный район клетки и тянутся по направлению к ее периферии. Распространение виментиновых филаментов по клетке после митоза происходит лишь вслед за восстановлением микротрубочек. Виментиновые волокна окружают ядро; кроме того, они вступают в тесный контакт с волокнами натяжения. Хотя промежуточные филаменты фибробластов состоят в целом из виментина, по меньшей мере в одном случае — у фибробластов сердца — в филаментах достоверно обнаружено также небольшое количество десмина, белка, который находят обычно в мышечных клетках. По-видимому, десмин в сердечных фибробластах сополимеризуется с виментнном при образовании промежуточных филаментов. Для изучения локализации цитоскелетных белков применяются главным образом иммуноцитохимические методы. Надежность результатов, получаемых с помощью этих методов, зависит как от специфичности используемых антител, так и от доступности для антител изучаемого компонента цитоскелета. То, что на иммунофлуоресцентные методы исследования можно в целом полагаться, достаточно убедительно доказывается опытами, в которых путем микроинъекции вводили в клетки флуоресцентно меченные белки. Такие опыты были поставлены с а-актинином, винкулином, тубулином, белками, ассоциированными с микротрубочками, и актином. Однако ни в одном из опытов не было выявлено никаких новых структур, отличных от тех, в которых используемый для микроинъекции белок уже был обнаружен прежде методом иммунофлуоресценции. Это подтверждает специфичность иммунофлуоресценции, хотя, впрочем, и не исключает возможности существования таких структур, которые настолько плотны или стабильны, что в них не могут проникнуть ни антитела, ни экзогенные структурные белки. Цитоскелет фибробластов можно исследовать с высоким разрешением с помощью электронного микроскопа. Некоторые из иммуноцитохимических методов были модифицированы для применения их в электронной микроскопии, что сделало возможным электронно-микроскопическое выявление отдельных белков. Дополнительные детали структуры удается выявить путем использования экстрагированных препаратов цитоскелета или надлежащим образом фиксированных целых клеток. Когда фибробласты экстрагируют раствором с невысоким осмотическим давлением, многие фибриллярные структуры сохраняются и могут быть идентифицированы иммуноферритиновым методом. Видны актиновые филаменты, ассоциированные друг с другом, а также с микротрубочками и промежуточными филаментами. В дополнение к этим трем основным типам фибриллярных структур в таких цитоскелетных препаратах выявляются многочисленные гетерогенные нити, сшивающие филаменты трех основных систем между собой. В более мягких условиях, при экстракции клеток в присутствии защищающей их сахарозы, можно выявить еще более сложную сеть. В такой сети нити расположены столь густо и имеют порой столь маленький диаметр, что различить их на обычных тонких срезах клетки не удается. Наконец, совсем уже сложная картина, включающая тончайшие, изменчивые микротрабекулы, связанные как с филаментами основных тиггов, так и с внутриклеточными органеллами, наблюдается тогда, когда толстые срезы интактных клеток или прямо целые клетки, выращенные на подложках для электронной микроскопии, исследуются с помощью высоковольтных электронов. Увеличение сложности фибриллярных структур в результате мер по защите цитоскелета во время приготовления препаратов отражает, возможно, различия в продолжительности нахождения разных белков в составе цитоскелета. В самом деле, те белки, которые включаются в цитоскелет на короткое время (но достаточно часто), будут обнаруживаться в препарате лишь с помощью методов, обеспечивающих стабилизацию их связи с цитоскелетом, тогда как в случае значительной экстракции будут выявляться преимущественно те белки, для которых обмен с растворимой фазой клетки происходит редко.

Применение фибробластов в косметологии

Фибробласты нашли свое применение в процедурах, направленных на омоложение и замедление естественных процессов старения дермы. Известно, что процесс старения дермы вступает в активную фазу с возраста 25-30 лет и в этом процессе изменения происходят в первую очередь именно на клеточном уровне.

Старение начинается со спада активности фибробластовых клеток: они перестают синтезировать нужное количество коллагеновых и эластиновых волокон, до критической точки падает уровень гиалуроновой кислоты.

Разумеется, эти скрытые процессы отражаются на состоянии дермы: она становится тонкой, пересыхает, принимает бледный или сероватый оттенок. Эпителий также утрачивает упругость и эластичность, в результате чего на кожном покрове появляются морщинистые сеточки, которые постепенно разрастаются и приобретают глубину, превращаясь в возрастные складки. И чем старше человек – тем быстрее темпы развития этих негативных процессов. Быстрее всего возрастные изменения проявляются в области шеи, лица, зоны декольте и рук.

Благодаря клеточным технологиям процесс старения можно если не остановить, то существенно снизить его интенсивность. Стимуляция клеток-фибробластов сражается со старением изнутри и потому процедуры с использованием клеток данного вида так эффективны.

SPRS вернет молодость вашей коже!

Как СПРС может вернуть молодость коже? Нашу кожу делают свежей, юной и упругой так называемые фибробласты — специальные клетки дермы. По мере взросления и старения в организме становится все меньше этих клеток: фибробласты теряют активность, не производят волокна коллагена и эластина, образующие каркас кожи, в прежнем режиме, а так же вырабатывают недостаточно гиалуроновой кислоты, поддерживающей дерму увлажненной. Из-за этого она теряет толщину и упругость, постепенно начиная покрываться морщинами.

SPRS терапия — тщательно подобранный индивидуальный комплекс процедур по диагностике, лечению и восстановлению кожи, суть которого — использование только собственных фибробластов человека (фибробластов). Эту методику разработали специалисты ИСКЧ, лидирующего в области применения клеточных технологий по России. Институт является первой организацией, которой РосЗдравнадзор выдал разрешение на внедрение данной технологии восстановления молодости.

Фибробластовые инъекции: суть процедуры

Суть процедуры достаточно проста: в дерму трансплантируются молодые клеточки соединительной ткани. Причем в методе используются собственные клетки, что позволяет не только избежать реакции отторжения, но и максимально ускорить процессы обновления и регенерации кожного покрова. Результат процедуры будет заключаться в заметном улучшении цвета лица, сокращении морщин всех типов (от мимических до глубоких), глубоком увлажнении дермы, заживлении рубцов и постакне.

Главное достоинство технологии состоит в том, что инъекции фибробластов высокоэффективны и сохраняют свои полезные качества в течение долгого срока.

Результат от процедуры будет сохраняться минимум до полугода!

И все это время в дерме активно и в нужном количестве будут вырабатываться коллаген, эластин и гиалурон.

Клетки для инъекций добывают из дермы пациента, маленький кусочек которой обычно берется с области пупка или из области за ушами. Именно в этих областях человеческого тела кожа наименее подвержена негативному воздействию факторов внешней среды. Это кусочек в лабораторных условиях тщательно исследуют и обрабатывают, стимулируя рост молодых клеточек-фибробластов. В среднем культивирование клеток занимает месяц-полтора, после чего инъективным путем, выросшие клетки вводятся пациенту клиники в зону, нуждающуюся в коррекции.

Выраженного результата можно ожидать уже после первого сеанса аутотрансплантации, но для достижения значимого эффекта косметологи советуют пройти двухнедельный курс. Спустя полгода после процедуры глубина возрастных изменений в зоне вокруг глаз сокращается почти до девяноста процентов, вокруг рта – до пятидесяти пяти процентов, на шее и в области груди — до девяноста пяти процентов.

Процесс введения клеток в проблемную зону

График введения клеток в проблемную зону кожи зависит от:

времени, необходимого для получения культуры клеток;
терапевтической дозы препарата живых клеток;
индивидуальных особенностей кожи пациента;
от выбора оптимальной схемы терапии, рекомендованной врачом.

Зона введения клеток

Зона, в которую осуществляется внутрикожное введение фибробластов определяется врачом и пациентом совместно. Как правило, выбираются проблемные области лица — вокруг глаз, носогубные складки. Препарат клеток также может вводиться в область шеи, декольте.

Особенный интерес представляет использование аутологичных фибробластов для омоложения кожи тыльной поверхности кистей рук. Аутологичные фибробласты могут вводиться в область рубцов, стрий, морщин.

В зависимости от глубины и выраженности изменений кожи используется папульный или туннельный способ введения препарата клеток.

Процедура введения живых клеток

процедура проводится под местной анестезией. В проблемную зону пациента тоненькой иголочкой врач вводит препарат, обогащённый фибробластами;
в зависимости от проблемы, может потребоваться несколько сеансов;
процедура проводится под местной анестезией. Тоненькой иголочкой врач вводит препарат, обогащённый фибробластами, в проблемную зону пациента;
после процедуры может возникнуть лёгкое покраснение и отёчность, которое исчезнет в течение 2 — 3 часов.

При введении в кожу активных фибробластов запускаются естественные процессы восстановления дермы. Эффект от процедуры начинает проявляться уже через 6 — 8 часов после сеанса и со временем нарастает. Спустя 8 — 9 месяцев после курса лечения наблюдается стойкий положительный результат.